EXPRESIÓN DE PROTEÍNAS ASOCIADAS AL DIAFRAGMA DE FILTRACIÓN GLOMERULAR EN NIÑOS CON SÍNDROME NEFRÓTICO

Ariel A. Arteta, Beatriz E. Vieco, Luis F. Arias.
Grupo PRYT, Departamento de Patología, Facultad de Medicina, Universidad de Antioquia, Medellín, Colombia.

Mutaciones en los genes que codifican las proteínas asociadas al diafragma de filtración (PA-DF) (como nefrina, podocina y a4-actinina) han sido determinadas como causas de síndrome nefrótico (SN) familiar y esporádico. En nuestro país tenemos una frecuencia alta de glomeruloesclerosis focal y segmentaria (GEFyS) comparada con otras poblaciones (1). Desconocemos las razones de esta mayor frecuencia, pero podrían estar implicados genes que codifican PA-DF (2,3). Intentamos determinar alteraciones en la expresión de estas proteínas en el tejido renal de niños con SN.

Material y métodos. Tejido renal congelado, sobrante del utilizado para inmunofluorescencia en diagnóstico rutinario, proveniente de 16 pacientes con SN, fueron estudiados para expresión de podocina (extremo C-terminal [C-ter]), nefrina (C-ter) y alfa-actinina-4 (extremos C-ter y N-ter) por inmunofluorescencia indirecta utilizando anticuerpos comerciales (Santa Cruz Biotech Inc, USA). 7 casos tienen diagnóstico por biopsia de cambios glomerulares mínimos (CGM), 5 de GEFyS, y uno cada uno de glomerulonefritis (GN) membranosa, GN postinfecciosa, nefropatía IgA y enfermedad de depósitos densos. Para efectos de comparación realizamos la misma técnica en 7 biopsias de tejido renal normal, obtenidas como protocolo de donantes para trasplante (todos adultos), en 7 biopsias renales de pacientes con proteinuria en rango no nefrótico (6 adultos y un niño) y en 2 casos de biopsia renal de pacientes con hematuria aislada (1 adulto y 1 niño).

Resultados. La expresión de podocina, nefrina y los dos extremos de a4-actinina es uniforme, lineal o muy finamente granular en la parte basal de los podocitos (parte externa de la membrana basal) en los casos de tejido renal normal y de pacientes sin proteinuria. En la mayoría de niños con SN de diversa etiología la expresión de podocina, nefrina y a4-actinina es irregular, discontinua y/o granular gruesa. Hubo negatividad (ninguna expresión) para podocina, nefrina y alfa-actinina-4 (N-ter) en un caso de GEFyS, negatividad para a4-actinina (N-ter) en 2 casos de GEFyS y uno de CGM, y negatividad para alfa-actinina-4 (C-ter) en un caso de CGM. Inesperadamente el caso de nefropatía IgA con SN mostró negatividad para nefrina y el caso de enfermedad de depósitos densos fue negativo para podocina, nefrina y alfa-actinina-4 (C-ter). En algunos casos de síndrome nefrótico la positividad para algunas de estas proteínas fue intensa, pero no podemos hablar de “sobre-expresión” porque no tenemos un sistema que permita cuantificarla: la positividad y negatividad es determinada cualitativamente.

Discusión. En pacientes con síndrome nefrótico hay pérdida de la distribución normal de la podocina, nefrina y alfa-actinina-4, indicando una desestructuración del diafragma de filtración (primaria o secundaria). Sólo en algunos casos de pérdida de la expresión de PA-DF podemos sugerir que la enfermedad sea debida a alteraciones genéticas, y esto abre interrogantes y plantea hipótesis para futuros trabajos que busquen acercamientos a la etiología del síndrome nefrótico, y más específicamente la GEFyS, en nuestros pacientes. Un caso de GEFyS con pérdida simultánea de la expresión de podocina, nefrina y alfa-actinina-4 (N-ter) es difícil de explicar, suponer una alteración simultánea de varios genes no parece muy factible, lo que sugiere es una pérdida de estas proteínas por algún otro mecanismo; este tejido mostró positividad para alfa-actinina-4 (C-ter), lo que nos indica que no es un tejido inadecuadamente procesado. En conclusión, en pacientes con SN hay redistribución de PA-DF, su presencia en SN de diferente etiología indica que es una consecuencia y no una causa de la enfermedad. Sólo en algunos de nuestros casos, en los que hay pérdida de su expresión, podemos plantear la posibilidad de alteraciones en genes codificando estas proteínas.

Referencias
1. Mejía G, Builes M, Arbeláez M, Henao JE, Arango JL, García A. Acta Médica Colombiana 1989; 14: 369-374.
2. Hingorani SR, Finn LS, Kowalewska J, McDonald RA, Eddy AA. Pediatr Nephrol 2004; 19: 300–305.
3. Tryggvason K, Patrakka J, Wartiovaara J. N Engl J Med 2006; 354: 1387-1401.

[Arriba]